激光共聚焦显微镜是一种高科技显微镜;以荧光显微镜成像为基础,加装了激光扫描装置,计算机进行图像处理,使用紫外或可见光激发荧光探针,得到细胞或组织内部细微结构的荧光图像。
原理:
激光共聚焦显微镜利用放置在激光光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔,实现点照明和点探测。激光光源通过照明针孔发射出的光,聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光在探测针孔上成像,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以“像点”的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动到共焦平面上,样品的新层面又成像在显示器上,随着Z轴的不断移动,就可得到样品不同层面连续的光切图像。