激光共聚焦显微镜的使用注意事项介绍

激光共聚焦显微镜是一种**显微镜技术，使用时需要特别注意以下事项，以确保实验的准确性和仪器的安全性：

一、操作规程

严格按照使用规则操作，不得随意更改操作程序。激光共聚焦显微镜中的激光发射管具有有限的使用寿命并且价格昂贵，因此，在操作过程中应特别注意保护激光管。

启动或更改激光功率后，激光光源需要大约20分钟才能稳定下来。在此期间，避免进行任何可能影响激光稳定性的操作。

二、安全防护

小心不要接触中等功率和高功率的激光辐射，特别注意不要直视激光束或样品。

不得在共聚焦显微镜附近存放或使用易燃或易爆物质，液体或气体。布或纸等易燃材料不应放在光路中。

三、日常管理与维护

为共聚焦显微镜指定仪器负责人，由专人负责仪器的开关机，规范的开关机对于共聚焦显微镜，尤其是激光器及汞灯的维护极为重要。

每天检查仪器的运行状态，确保仪器处于良好的工作状态。

充分利用好仪器的开机时间，避免共聚焦显微镜空转造成的浪费。一旦出现超过半小时以上的空档时间，应及时协调仪器使用，通知预约较晚时间点的人员提前使用。

使用光盘或者网盘保存数据，严禁插拔U盘或者硬盘拷贝数据，避免病毒侵染共聚焦显微镜系统。

四、使用技巧

根据实验需求选择合适的探测器和滤光片。常见的探测器包括光电倍增管(PMT)和雪崩光电二极管(APD)，它们具有不同的检测范围和灵敏度。滤光片的选择决定了激光的发射和接收，应根据样品的荧光颜色选择合适的滤光片。

注意样品的处理和固定。不同的固定方法适用于不同类型的样品，如化学固定、交联固定和冷冻固定等。处理样品时要尽量避免引入氧气，以防止荧光物质的氧化。

控制激光的功率和曝光时间。激光功率过高会导致样品的灼伤和荧光物质的衰减，因此应通过实验确定适当的功率范围。同样地，曝光时间也需要适当调整以避免图像的过曝。

选择适当的对焦方式。自动对焦或手动对焦等方式均可选择，但需要根据实验需求和个人习惯进行选择。

五、其他注意事项

仪器周围要远离电磁辐射源，环境无震动、无强烈的空气扰动，室内具有遮光系统以保证荧光样品不会被外源光漂白。

控制工作温度在5～25℃，确保仪器在适宜的温度下运行。

通过遵循以上使用注意事项，可以确保激光共聚焦显微镜的正常运行和实验的准确性。