显微镜生物玻片的制作可分为以下三步:
清洗生物玻片、制作涂片、制作装片
一、生物显微镜切片清洗
显微镜标本切片的清洗将直接影响生产质量,因此制作显微镜标本切片的**步是清洗载玻片和盖玻片。
新购买的生物玻片不可以直接用,要先在95%的酒精中浸泡,去除表面的附着物,在使用前取出,晾干或烘干备用。
用过的旧生物玻片,先用肥皂水或洗衣粉水煮0.5h,冷却后用软刷刷掉污垢,用自来水冲洗,放入95%酒精中备用。如果是石蜡切片,可以先在二甲苯中浸泡几个小时(可以用制片时回收的废弃二甲苯,既能避免环境污染,又能节省实验成本),溶解用于密封的树胶,将盖玻片和玻片分开,然后用肥皂水煮。
二、制作生物显微镜切片步骤
1)制作生物显微镜切片需要的材料有:盖玻片、载玻片、解剖针、刀片、毛笔等
2)取材→切片→选片→固定与染色→脱水→透明→封片
1、取材完整;选择标本应力求新鲜,如果内部构造发生糜烂,制片观察会影响标本结构的完整。
2、切片时,切片和材料上都应不时地沾上水;动作要均匀有力,一刀切下,不得拉割或中途停顿。
3、在切完片子后,先把玻片放在30%酒精水溶液中,让酒精的张力自动把皱摺展开,然后再将玻片移到热水,这样的片子会较薄;如酒精浓度过高,容易引起玻片破碎,出现裂隙,像脂肪之类细胞间粘附性较小的组织一碰到酒精就会散开,故不能用此法。
4、载玻片、盖玻片要清洗干净。
5、把制作好的切片或者需要观察的培养液滴进蒸馏水中。
6、拿着盖玻片使用约四十五度的角慢慢放下,让盖玻片盖住标本不要有气泡,被挤出来的多余的水用吸纸给吸干这样就算可以完成了。
7、封片时,树胶滴加要适量,以盖玻片盖上时树胶刚好扩散至其边缘为宜;树胶浓度也要适当,要既有一定的粘稠度又不能过于浓,可以在盖玻片下缓缓散开为宜。