显微镜在核孔复合组织提出了新的见解:核孔复合物 (NPC)在核膜一个大的蛋白质复合物,表示其栅极连接到所述真核基因构成。 这种复杂的由几百形成为注定要进入或离开核化合物的选择性栅极蛋白质。
正因为如此出色的功能NPC的结构是很大的兴趣。 到目前为止,全国人大结构分析已主要限于结晶研究或电子显微镜。 单组分的几种结构已经被破译通过晶体学。 然而,复杂的内各个蛋白质的组织仍然难以捉摸。 一个间隙现已关闭通过使用超分辨率显微镜。
扬Ellenberg和他的科学家团队在EMBL海德堡已经获得了新的见解的NPC结构的显微镜基态损耗(GSD)的帮助。
安娜·辛波丝卡*近公布的这项研究的科学文章中的结果“核孔支架结构由超分辨率显微镜和粒子平均分析”和她的成就的意见和基态损耗显微镜的蛋白复合物的分析在随后的采访中的潜力。
GSDIM方法的研究优势有哪些?
在我们的研究中,我们试图了解大型多蛋白复合物,如核孔复合物(NPC),都建立。 因为它们的尺寸和复杂性,例如分子机器都超出了单个方法的范围和长期以来一直用于结构生物学的一个挑战。 原子分辨率的方法,例如X射线晶体学或核磁共振需要纯化的样品,并且不适合于非常大的集。 虽然,电子显微镜可以观察大复合体在其天然环境中的细胞,它往往是很困难的分配的电子密度,以个别蛋白质。 在荧光显微镜中的蛋白质的身份是已知的,超分辨率(SR)现在让我们来可视化低于衍射JI限的细节。 当SR被结合的颗粒平均,蛋白'位置可以被映射到一个亚纳米精度,一个尺度,使得适用于大型复合结构的研究光镜。 因此SR显微镜可以连接不同类型的数据,*终帮助生成的多蛋白组件伪原子模型。 此外,特别是GSDIM等本地化SR方法的一大优势是,他们使用比较简单,并定期让蛋白,是10-20纳米相隔的分辨率。 这对我们来说很重要,因为我们能够获得大的数据集,并期待在许多不同的标记在一个相对有效的方式。