单分子定位技术受制于较长的采集和计算时间,或者需要特殊的荧光团或具有生物毒性的光化学环境。在这里,我们提出了一种广域荧光显微镜的统计超分辨率技术,我们将其称为多信号分类算法,它具有多个优点。它提供了至少50 nm的分辨率,需要更少的帧和更低的激发功率,甚至在高荧光团浓度下也可以工作。
此外,它还可以在记录的时间范围内与任何闪烁的荧光团一起使用。与单分子定位技术和四种当代统计超分辨率方法进行体外肌动蛋白丝实验和其他独立获得的实验数据集相比,多信号分类算法显示出可比或更好的性能。我们还在没有成像缓冲液的活细胞微管和活细胞肌动蛋白丝样品中以245 ms(使用每秒200帧的速度获取49帧)的时间尺度展示了超分辨率。